3 versteckte Fallstricke bei DMPK-Transporter-Assays | SeamlessBio
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3 versteckte Fallstricke
bei ABC-Transporter-
Vesikel-Assays

Was die meisten DMPK-Labore nicht wissen, kostet sie Reproduzierbarkeit, Zeit und das Vertrauen der Aufsichtsbehörden. Laden Sie den kostenlosen Leitfaden herunter.

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Warum wir diesen Leitfaden erstellt haben

Ein 90-sekündiger Überblick über die drei häufigsten Fallstricke – und wie aus HEK293-Zellen gewonnene Vesikel diese lösen.

Die 3 Fallstricke – auf einen Blick

1

Sf9-Lot-Variabilität – Das Problem des Zeitpunkts beim Baculovirus

Sf9-Insektenzellen produzieren durch Baculovirus-Infektion ABC-Transporter-Vesikel. Das Problem: Die Vesikelaktivität hängt entscheidend vom Zeitpunkt der Entnahme nach der Infektion ab. Ein Unterschied von 12 Stunden kann die BSEP-Aktivität zwischen den Chargen um das 3- bis 5-Fache verschieben. Die Reproduzierbarkeit Ihrer IC50-Datenbank ist nur so gut wie die Ihrer variabelsten Charge.

HEK293-Korrektur: Festlegung des ATP/AMP-Verhältnisses auf ≥10 (BSEP) bei jedem CoA
2

Kein EU-Lieferant – Versand immer mittwochs

Der führende Anbieter mit Sitz in den USA versendet TranSelect-Produkte ausschließlich mittwochs. Bestellungen müssen bis zum vorhergehenden Donnerstag eingegangen sein. Für DMPK-Labore, die unter Zeitdruck aufgrund von IND-Fristen stehen oder Projekte kurzfristig starten müssen, stellt eine Vorlaufzeit von 7 bis 14 Tagen bei jeder Nachbestellung ein echtes betriebliches Risiko dar.

EU-Versand: Cell4Pharma versendet aus Passau – 2–4 Werktage, keine festen Zustelltage
3

HK-2 weist keine OAT1/OAT3 auf – Die Lücke bei der Nierenuntersuchung

HK-2 ist das Standardmodell für Nierenzellen in den meisten präklinischen Labors – allerdings exprimiert es weder OAT1 noch OAT3 stabil, die beiden Transporter im proximalen Tubulus, die für die Aufnahme der meisten über die Nieren ausgeschiedenen Wirkstoffe verantwortlich sind. Ergebnis: 19% der Fehlschläge in Phase III stehen im Zusammenhang mit Nephrotoxizität, doch nur 2% werden bereits in der präklinischen Phase erkannt.

ciPTEC-Korrektur: OAT1 + OAT3 werden stabil exprimiert – AZ-validiert, über 90 Veröffentlichungen

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