{"id":2652,"date":"2026-07-14T09:32:22","date_gmt":"2026-07-14T08:32:22","guid":{"rendered":"https:\/\/seamlessbio.de\/?p=2652"},"modified":"2026-07-14T09:35:24","modified_gmt":"2026-07-14T08:35:24","slug":"ivd-kalibrator-aus-menschlichem-serum-mit-vermindertem-vitamin-d-gehalt","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/seamlessbio.de\/de\/vitamin-d-depleted-human-serum-ivd-calibrator\/","title":{"rendered":"Vitamin-D-abgereichertes Humanserum f\u00fcr die Herstellung von IVD-Kalibratoren \u2013 Ein praktischer Leitfaden"},"content":{"rendered":"<p><!-- Direkt als HTML-Block in Gutenberg einf\u00fcgen --><br \/>\n<!-- Gutenberg: + Block hinzuf\u00fcgen \u2192 Benutzerdefiniertes HTML \u2192 einf\u00fcgen --><\/p>\n<div class=\"sb-blog-content\" style=\"max-width: 780px; margin: 0 auto; font-family: -apple-system,BlinkMacSystemFont,'Segoe UI',Arial,sans-serif; font-size: 16px; line-height: 1.75; color: #1a2e35;\">\n<style>\n.sb-blog-content h2 {font-size:26px;font-weight:800;color:#1a2e35;margin:48px 0 16px;line-height:1.25}<br \/>\n.sb-blog-content h3 {font-size:20px;font-weight:700;color:#1a2e35;margin:32px 0 12px}<br \/>\n.sb-blog-content p {margin:0 0 20px;color:#374151;line-height:1.8}<br \/>\n.sb-blog-content strong {color:#1a2e35;font-weight:700}<br \/>\n.sb-blog-content ul {margin:0 0 20px 0;padding:0;list-style:none}<br \/>\n.sb-blog-content ul li {padding:6px 0 6px 22px;position:relative;color:#374151;border-bottom:1px solid #f0f4f4;font-size:15px}<br \/>\n.sb-blog-content ul li::before {content:\"\u2192\";position:absolute;left:0;color:#18b7b2;font-weight:700}<br \/>\n.sb-blog-content hr {border:none;border-top:1px solid #e8f0ef;margin:40px 0}<br \/>\n.sb-blog-content em {color:#555;font-style:italic}<br \/>\n.sb-blog-content a {color:#18b7b2;text-decoration:none;font-weight:600}<br \/>\n.sb-blog-content a:hover {text-decoration:underline}<br \/>\n.sb-blog-content blockquote {background:#f5f7f7;border-left:4px solid #18b7b2;padding:16px 20px;margin:24px 0;border-radius:0 8px 8px 0}<br \/>\n.sb-blog-cta {background:linear-gradient(135deg,#18b7b2 0%,#0f9490 100%);border-radius:16px;padding:36px 40px;margin:48px 0;text-align:center}<br \/>\n.sb-blog-cta h3 {color:#fff;font-size:22px;font-weight:800;margin:0 0 10px}<br \/>\n.sb-blog-cta p {color:rgba(255,255,255,.88);margin:0 0 20px;font-size:15px}<br \/>\n.sb-blog-cta a {display:inline-block;background:#1a2e35;color:#fff!important;padding:12px 28px;border-radius:50px;font-size:13px;font-weight:700;letter-spacing:.05em;text-transform:uppercase;text-decoration:none!important}<br \/>\n<\/style>\n<p>Die Vitamin-D-Untersuchung geh\u00f6rt weltweit zu den am h\u00e4ufigsten durchgef\u00fchrten klinisch-chemischen Tests. J\u00e4hrlich werden mehrere zehn Millionen 25-Hydroxyvitamin-D-Tests auf automatisierten Immunoassay-Plattformen durchgef\u00fchrt \u2013 und jedes dieser Testkits ben\u00f6tigt eine Kalibriermatrix, aus der Vitamin D auf Hintergrundniveau reduziert wurde. Bei dieser Matrix handelt es sich um Human Processed Serum (HPS) ohne Vitamin D.<\/p>\n<p>In diesem Leitfaden wird erl\u00e4utert, was es ist, wie es hergestellt wird, warum die menschliche Matrix f\u00fcr die Genauigkeit des Assays von Bedeutung ist und worauf bei der Beschaffung f\u00fcr die IVD-Herstellung zu achten ist.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Was ist Vitamin-D-abgereichertes Human-Processed-Serum (HPS)?<\/h2>\n<p>Vitamin-D-abgereichertes humanes verarbeitetes Serum (HPS) ist gepooltes Humanserum, das einer Aktivkohle-Strippung unterzogen wurde, um endogenes 25-Hydroxyvitamin D (25-OH-D\u2082 und 25-OH-D\u2083) sowie 1,25-Dihydroxyvitamin D auf Restkonzentrationen unter 4 ng\/ml reduziert wurde \u2013 diese Werte sind auf Standard-Immunoassay-Plattformen in der Regel nicht nachweisbar.<\/p>\n<p>Das Produkt wird in der IVD-Branche und in der wissenschaftlichen Literatur auch unter verschiedenen alternativen Bezeichnungen gef\u00fchrt:<\/p>\n<ul>\n<li><strong>Vitamin-D-freies Humanserum<\/strong> \u2014 von US-amerikanischen Lieferanten, darunter Golden West Biologicals, verwendete Terminologie<\/li>\n<li><strong>Von Vitamin D befreites Humanserum<\/strong> \u2014 h\u00e4ufig in Protokollen f\u00fcr klinische Studien und zur Methodenentwicklung<\/li>\n<li><strong>Serum mit Aktivkohle (Vitamin D)<\/strong> \u2014 Beschreibung des Verarbeitungsverfahrens<\/li>\n<li><strong>Serum mit vermindertem 25-OH-D-Gehalt<\/strong> \u2014 analytspezifischer Deskriptor<\/li>\n<li><strong>HPS Vitamin-D-Mangel<\/strong> \u2014 SEQENS IVD \/ Avantor-Nomenklatur, der pr\u00e4ziseste Fachbegriff f\u00fcr IVD<\/li>\n<\/ul>\n<p>Unabh\u00e4ngig von der in Ihrer Spezifikation oder Ihrem technischen Dossier verwendeten Terminologie beschreiben diese Produkte dieselbe Matrix \u2013 menschliches Serum, aus dem Vitamin D so weit entfernt wurde, dass es unterhalb der Nachweisgrenze des Assays liegt.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Warum Humanserum \u2013 und kein Puffer oder keine synthetische Matrix?<\/h2>\n<p>Die Wahl der Matrix f\u00fcr Vitamin-D-Kalibratoren ist nicht willk\u00fcrlich. Menschliches Serum ist aus zwei Gr\u00fcnden die bevorzugte \u2013 und in vielen F\u00e4llen vorgeschriebene \u2013 Grundmatrix.<\/p>\n<p><strong>Vitamin-D-bindendes Protein (DBP) und Albumin.<\/strong> Im menschlichen Serum sind etwa 85% des zirkulierenden 25-OH-D an das Vitamin-D-bindende Protein (DBP) und etwa 15% an Albumin gebunden. Nur 0,03% ist wirklich frei. Die meisten Immunoassay-Plattformen verwenden Antik\u00f6rper oder DBP-kompetitive Formate, die mit dem gesamten Vitamin D \u2013 sowohl gebundenem als auch freiem \u2013 interagieren. Werden Kalibratoren in Puffer statt in Humanserum hergestellt, fehlt der DBP-Hintergrund, und die Assay-Reaktion auf zugesetztes Vitamin D unterscheidet sich von der Reaktion in Patientenproben. Dies f\u00fchrt zu einem systematischen Kalibrierungsfehler \u00fcber den gesamten klinischen Bereich hinweg.<\/p>\n<p>Durch die Herstellung von Kalibratoren aus Vitamin-D-armem Humanserum bleiben der DBP- und der Albumin-Hintergrund erhalten \u2013 dadurch wird sichergestellt, dass die Kalibratormatrix mit der Patientenprobenmatrix \u00fcbereinstimmt, und die methoden\u00fcbergreifende Verzerrung wird minimiert.<\/p>\n<p><strong>Anforderungen an die IVDR-Matrix.<\/strong> Gem\u00e4\u00df den Leistungsanforderungen in Anhang I der Richtlinie IVDR m\u00fcssen Hersteller nachweisen, dass die Leistungsf\u00e4higkeit des Assays in einer f\u00fcr die vorgesehene Probenart repr\u00e4sentativen Matrix nachgewiesen wurde. F\u00fcr Vitamin-D-Assays auf Serumbasis bedeutet dies, dass die Kalibratoren in einer Matrix aus menschlichem Serum hergestellt werden m\u00fcssen \u2013 nicht in Puffer oder tierischem Serum. Als Standardl\u00f6sung dient Vitamin-D-abgereichertes menschliches Serum.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Wie wird Vitamin-D-armes Serum hergestellt?<\/h2>\n<p>Der Herstellungsprozess f\u00fcr HPS-Vitamin-D-abgereichertes Vitamin D umfasst zwei Hauptschritte.<\/p>\n<p><strong>Schritt 1 \u2013 Entfettung.<\/strong> Das gepoolte Humanserum wird mit Dextransulfat und Magnesiumchlorid oder Calciumchlorid behandelt, wodurch Lipoproteine (VLDL, LDL, HDL) ausfallen. Das Serum wird zentrifugiert und filtriert, wodurch Lipide entfernt werden, die andernfalls eine Tr\u00fcbung verursachen und die photometrischen Messungen beeintr\u00e4chtigen w\u00fcrden. Da der gr\u00f6\u00dfte Teil des Vitamin D an Lipoproteinfraktionen gebunden ist, f\u00fchrt die Entfettung auch zu einem teilweisen Verlust von Vitamin D \u2013 jedoch nicht in dem Ma\u00dfe, wie es f\u00fcr die Verwendung als Kalibrator erforderlich w\u00e4re.<\/p>\n<p><strong>Schritt 2 \u2013 Entfernen der Kohle.<\/strong> Dem entfetteten Serum wird mit Dextran beschichtete Aktivkohle zugesetzt. Die Aktivkohle adsorbiert kleine hydrophobe Molek\u00fcle, darunter Vitamin-D-Metaboliten, Steroide, Schilddr\u00fcsenhormone und Fetts\u00e4uren. Die Aktivkohle wird durch Zentrifugation und Filtration entfernt, sodass ein Serum zur\u00fcckbleibt, das frei von den Zielanalyten ist. Es k\u00f6nnen mehrere Aktivkohle-Behandlungszyklen durchgef\u00fchrt werden, um einen Restgehalt an 25-OH-D von unter 4 ng\/ml zu erreichen.<\/p>\n<p><strong>Schritt 3 \u2013 Sterile Filtration und Qualit\u00e4tskontrolle.<\/strong> Das aufbereitete Serum wird bei 0,2 \u00b5m steril gefiltert und vor der Freigabe mittels Immunoassay und\/oder LC-MS\/MS auf 25-OH-D-R\u00fcckst\u00e4nde untersucht. Ein Virus-Screening (HIV-1\/2, HBsAg, Anti-HCV, Syphilis) wird chargenweise durchgef\u00fchrt.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Spezifikation f\u00fcr den 25-OH-D-Restwert \u2013 Welchen Wert ben\u00f6tigen Sie?<\/h2>\n<p>Die Standardspezifikation f\u00fcr HPS \u201eVitamin D-abgereichert\u201c ist ein Restgehalt an 25-OH-D von unter 4 ng\/ml. Dies reicht f\u00fcr die meisten Anwendungen mit Immunoassay-Kalibratoren aus, bei denen der niedrigste Kalibrator im Kit in der Regel 10\u201315 ng\/ml betr\u00e4gt.<\/p>\n<p>Bei LC-MS\/MS-Methoden \u2013 bei denen die Nachweisgrenzen 1\u20132 ng\/mL erreichen k\u00f6nnen \u2013 kann jedoch eine strengere Spezifikation f\u00fcr Restgehalte erforderlich sein. Einige Protokolle zur Methodenentwicklung schreiben einen 25-OH-D-Restgehalt von unter 2 ng\/ml oder unter 1 ng\/ml vor. Dies l\u00e4sst sich durch zus\u00e4tzliche Aktivkohlebehandlungszyklen erreichen, muss jedoch vor der Anwendung im jeweiligen Assaysystem best\u00e4tigt werden.<\/p>\n<p>Wenn Sie HPS-Vitamin-D-Proben f\u00fcr LC-MS\/MS-Anwendungen beziehen, fordern Sie chargenspezifische Analysedaten an, aus denen der Restgehalt an 25-OH-D hervorgeht, der mit derselben Methode gemessen wurde, die Sie f\u00fcr Ihren Assay verwenden werden \u2013 nicht nur Immunoassay-Ergebnisse, da diese m\u00f6glicherweise keine Spurenr\u00fcckst\u00e4nde nachweisen, die den massenspektrometrischen Nachweis beeintr\u00e4chtigen k\u00f6nnten.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Worauf Sie bei der Beschaffung achten sollten \u2013 wichtige Parameter<\/h2>\n<p><strong>Virus-Screening pro Charge.<\/strong> HPS Vitamin D depleted ist ein gepooltes Humanblutprodukt. Jede Charge muss einzeln auf HIV-1\/2, HBsAg, Anti-HCV und Syphilis untersucht werden. F\u00fcr die Herstellung nach IVD wird zunehmend ein NAT-Screening (HIV-1-RNA, HCV-RNA, HBV-DNA) verlangt \u2013 insbesondere f\u00fcr Produkte, die in die technischen Unterlagen nach IVDR aufgenommen werden. Kl\u00e4ren Sie mit Ihrem Lieferanten, ob NAT standardm\u00e4\u00dfig durchgef\u00fchrt wird oder auf Anfrage verf\u00fcgbar ist.<\/p>\n<p><strong>R\u00fcckverfolgbarkeit der Spender.<\/strong> Die l\u00fcckenlose R\u00fcckverfolgbarkeit der Spender muss dokumentiert sein \u2013 nicht nur Aufzeichnungen auf Pool-Ebene. Dies ist f\u00fcr die Dokumentation gem\u00e4\u00df IVDR Anhang I sowie f\u00fcr die Einreichung technischer Unterlagen bei einer benannten Stelle erforderlich. Einige Lieferanten k\u00f6nnen keine individuelle R\u00fcckverfolgbarkeit der Spender f\u00fcr gepooltes Material gew\u00e4hrleisten \u2013 bitte vor der Bestellung \u00fcberpr\u00fcfen.<\/p>\n<p><strong>Chargenspezifische Analysedaten f\u00fcr CoA mit Vitamin D.<\/strong> Das Analysezertifikat muss den 25-OH-D-Restwert f\u00fcr diese spezifische Charge enthalten, nicht nur eine allgemeine Angabe. Schwankungen des Vitamin-D-Restgehalts von Charge zu Charge sind \u00fcblich \u2013 insbesondere bei Produkten, die ausschlie\u00dflich einer Entfettung unterzogen wurden. Bestehen Sie auf chargenspezifischen Messdaten.<\/p>\n<p><strong>Mengen- und Chargenkonsistenz.<\/strong> Bei der IVD-Fertigung wird die Leistung des Kalibrators anhand einer bestimmten Matrixcharge validiert. Nach der Validierung erfordert ein Wechsel der Charge eine erneute Validierung \u2013 was kostspielig und zeitaufwendig ist. Suchen Sie nach Lieferanten, die eine Chargenreservierung (die Bereitstellung einer validierten Charge f\u00fcr Ihren Produktionszyklus) ohne Vorauszahlung anbieten.<\/p>\n<p><strong>Dokumentation zu IVDR.<\/strong> Die Anforderungen an die technischen Unterlagen f\u00fcr Rohstoffe gem\u00e4\u00df Anhang II und Anhang III der Richtlinie IVDR umfassen: CoA, CoO, TSE\/BSE-Erkl\u00e4rung, Aufzeichnungen zum Viren-Screening sowie Aufzeichnungen zum Spender-Screening. F\u00fcr Hilfsstoffe kann ein ISO 13485-Herstellerzertifikat der Verarbeitungsanlage erforderlich sein. Bitte \u00fcberpr\u00fcfen Sie die Unterlagen vor der Bestellung von Produkten, die der IVDR-Verordnung unterliegen.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Plattformkompatibilit\u00e4t<\/h2>\n<p>HPS Vitamin D depleted ist mit allen g\u00e4ngigen automatisierten Immunoassay-Plattformen kompatibel, die f\u00fcr 25-OH-D-Tests verwendet werden:<\/p>\n<ul>\n<li><strong>Roche Diagnostics<\/strong> \u2014 Elecsys-Gesamt-Vitamin-D-Test (Elektrochemilumineszenz)<\/li>\n<li><strong>Abbott Diagnostics<\/strong> \u2014 Architect 25-OH-Vitamin D (CMIA)<\/li>\n<li><strong>DiaSorin<\/strong> \u2014 LIAISON 25-OH-Vitamin D GESAMT (CLIA)<\/li>\n<li><strong>Siemens Healthineers<\/strong> \u2014 ADVIA Centaur Vitamin D Gesamt<\/li>\n<li><strong>Beckman Coulter<\/strong> \u2014 Vitamin D Total aufrufen<\/li>\n<\/ul>\n<p>Bei LC-MS\/MS-Methoden wird die von Lipiden befreite Serummatrix f\u00fcr die auf Proteinausf\u00e4llung basierende Extraktion verwendet \u2013 die tr\u00fcbungsfreie, von Lipiden befreite Basis verhindert Artefakte durch Ionenunterdr\u00fcckung, die bei nicht von Lipiden befreitem Serum auftreten w\u00fcrden.<\/p>\n<hr \/>\n<h2>Wie viel brauchst du?<\/h2>\n<p>Die Bestellmengen f\u00fcr HPS mit reduziertem Vitamin-D-Gehalt variieren je nach Anwendungsbereich erheblich:<\/p>\n<p><strong>Methodenentwicklung \/ Durchf\u00fchrbarkeit des Assays:<\/strong> 100\u2013500 ml \u2013 ausreichend f\u00fcr die anf\u00e4ngliche Herstellung des Kalibrators und die Validierung der Zugabemenge und Wiederfindung.<\/p>\n<p><strong>Validierung des Assays (Leistungsstudie IVDR):<\/strong> 1\u20132 l \u2013 ausreichend f\u00fcr umfassende Untersuchungen der analytischen Leistungsf\u00e4higkeit, einschlie\u00dflich Linearit\u00e4t, Pr\u00e4zision, Richtigkeit und Interferenzen.<\/p>\n<p><strong>Kommerzielle Fertigung von IVD-Baus\u00e4tzen:<\/strong> 5\u201310+ Liter pro Produktionslauf \u2013 je nach Format des Kalibrierkits, Anzahl der Kalibrierstufen und Chargengr\u00f6\u00dfe. Bei Herstellern von Vitamin-D-Kits mit hohem Produktionsvolumen kann der Jahresbedarf 50\u2013100+ Liter erreichen.<\/p>\n<p>Bestellen Sie f\u00fcr die Fertigung stets mehr als Ihren unmittelbaren Bedarf \u2013 reservieren Sie eine vollst\u00e4ndige Produktionscharge, um Chargenwechsel w\u00e4hrend des Programms und die damit verbundenen Kosten f\u00fcr die erneute Validierung zu vermeiden.<\/p>\n<hr \/>\n<div class=\"sb-blog-cta\">\n<h3>SeamlessBio \u2013 HPS-Vitamin-D-Mangel bei der Herstellung von IVD<\/h3>\n<p>EU-Lieferant \u00b7 Passau, Deutschland \u00b7 100 ml bis \u00fcber 10 Liter \u00b7 Umfassendes Viren-Screening \u00b7 Chargenspezifische CoA- und IVDR-Dokumentation \u00b7 Chargenreservierung ohne Vorauszahlung \u00b7 Kostenloses Testmuster \u00b7 Angebotsantwort innerhalb von 48 Stunden<\/p>\n<p><a href=\"https:\/\/seamlessbio.de\/de\/humanes-aufbereitetes-serum-hps\/\">Spezifikationen und Angebot anfordern<\/a><\/p>\n<\/div>\n<hr \/>\n<h2>Literaturverzeichnis<\/h2>\n<p>Hollis BW. Die Bestimmung von 25-Hydroxyvitamin D im klinischen Umfeld: Herausforderungen und Anforderungen. <em>Am J Clin Nutr.<\/em> 2008;88(2):507S\u2013510S.<\/p>\n<p>Farrell CJL, Herrmann M. Bestimmung von Vitamin D und seinen Metaboliten. <em>Best Pract Res Clin Endocrinol Metab.<\/em> 2021;35(4):101488.<\/p>\n<p>Cavalier E. et al. Externe Qualit\u00e4tspr\u00fcfung von 25-Hydroxyvitamin D. <em>Clin Chim Acta.<\/em> 2014;431:60\u201365.<\/p>\n<p>IVDR Verordnung (EU) 2017\/746, Anhang I \u2013 Allgemeine Sicherheits- und Leistungsanforderungen.<\/p>\n<hr \/>\n<p><em>SeamlessBio GmbH, Passau, Deutschland. Dieser Artikel dient ausschlie\u00dflich wissenschaftlichen Informationszwecken. F\u00fcr Produktspezifikationen und Informationen zur Verf\u00fcgbarkeit wenden Sie sich bitte an info@seamlessbio.de.<\/em><\/p>\n<\/div>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Vitamin D testing is one of the highest-volume clinical chemistry assays performed globally. 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