{"id":9540,"date":"2026-10-20T15:11:16","date_gmt":"2026-10-20T14:11:16","guid":{"rendered":"https:\/\/wheat-quail-856400.hostingersite.com\/papain-solution-properties-use-cases\/"},"modified":"2026-10-20T15:18:29","modified_gmt":"2026-10-20T14:18:29","slug":"papain-loesung-eigenschaften-anwendungen","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/seamlessbio.de\/de\/papain-solution-properties-use-cases\/","title":{"rendered":"Papainl\u00f6sung: Eigenschaften, Aktivit\u00e4t und Anwendungen in der Zellkultur"},"content":{"rendered":"

Papain ist eine pflanzliche Protease aus der Papayafrucht. Im Labor wird es zur schonenden Dissoziation von Nerven- und anderen empfindlichen Geweben, zum Abl\u00f6sen adh\u00e4renter Zellen und zur Herstellung von Fab-Antik\u00f6rperfragmenten eingesetzt. Dieser Leitfaden erkl\u00e4rt, wie Papain wirkt, was seine Aktivit\u00e4t beeinflusst und wie Sie es in den h\u00e4ufigsten Anwendungen einsetzen.<\/p>\n

SeamlessBio liefert eine gebrauchsfertige Papainl\u00f6sung, Ca\u00b2\u207a\/Mg\u00b2\u207a-frei und ohne Phenolrot, sterilfiltriert<\/a>.<\/p>\n

Herkunft und Eigenschaften<\/h2>\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n
Eigenschaft<\/th>\nPapain<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n
Quelle<\/td>\nMilchsaft unreifer Papayafr\u00fcchte (Carica papaya<\/em>)<\/td>\n<\/tr>\n
Enzymklasse<\/td>\nCysteinprotease (EC 3.4.22.2)<\/td>\n<\/tr>\n
Molekulargewicht<\/td>\nca. 23,4 kDa (Einzelkette, 212 Aminos\u00e4uren)<\/td>\n<\/tr>\n
Aktives Zentrum<\/td>\nCystein (Cys25) und Histidin (His159)<\/td>\n<\/tr>\n
pH-Optimum<\/td>\nca. 6,0\u20137,0, aktiv \u00fcber einen breiten pH-Bereich<\/td>\n<\/tr>\n
Spezifit\u00e4t<\/td>\nBreit; spaltet bevorzugt nach basischen Aminos\u00e4uren und nach Resten, denen an P2 ein hydrophober Rest vorausgeht<\/td>\n<\/tr>\n
Aktivatoren<\/td>\nReduktionsmittel (z. B. L-Cystein), EDTA (bindet hemmende Schwermetallionen)<\/td>\n<\/tr>\n
Inhibitoren<\/td>\nE-64, Leupeptin, Iodacetamid, Schwermetallionen (z. B. Hg\u00b2\u207a), \u03b12-Makroglobulin im Serum<\/td>\n<\/tr>\n
Tierischer Ursprung<\/td>\nKeine \u2013 pflanzlichen Ursprungs<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

Da das aktive Zentrum ein Cystein enth\u00e4lt, ist Papain inaktiv, wenn dieser Rest oxidiert ist. Deshalb setzen viele Protokolle kurz vor der Verwendung L-Cystein zu. Pr\u00fcfen Sie CoA und Anleitung Ihres Papainprodukts, ob es aktiviert werden muss.<\/p>\n

Papain vs. Trypsin<\/h2>\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n\n
<\/th>\nPapain<\/th>\nTrypsin<\/th>\n<\/tr>\n<\/thead>\n
Herkunft<\/td>\nPflanzlich (Papaya)<\/td>\nTierisch (Rinder- oder Schweinepankreas) oder rekombinant<\/td>\n<\/tr>\n
Enzymklasse<\/td>\nCysteinprotease<\/td>\nSerinprotease<\/td>\n<\/tr>\n
Typischer Einsatz<\/td>\nNervengewebe, empfindliche Prim\u00e4rzellen<\/td>\nRoutinepassage adh\u00e4renter Zelllinien<\/td>\n<\/tr>\n
Wirkung auf Neuronen<\/td>\nH\u00e4ufig mit h\u00f6herer Viabilit\u00e4t beschrieben<\/td>\nIn vielen Protokollen sch\u00e4dlicher f\u00fcr Neuronen<\/td>\n<\/tr>\n
Abstoppen<\/td>\nVerd\u00fcnnen und Waschen, serumhaltiges Medium, Cysteinprotease-Inhibitoren<\/td>\nSerumhaltiges Medium oder Trypsininhibitor<\/td>\n<\/tr>\n
Tierfrei<\/td>\nJa<\/td>\nNur rekombinante Varianten<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n

Oberfl\u00e4chenmarker:<\/strong> Papain spaltet auch Oberfl\u00e4chenproteine. Welche Epitope erhalten bleiben, h\u00e4ngt vom Marker ab. Einige Blutgruppenantigene werden zum Beispiel bekannterma\u00dfen durch Papain zerst\u00f6rt. Wenn Sie Zellen nach der Dissoziation durchflusszytometrisch analysieren, pr\u00fcfen Sie, ob Ihre Marker unter den verwendeten Bedingungen stabil sind.<\/p>\n

Protokoll 1: Adh\u00e4rente Zellen abl\u00f6sen<\/h2>\n
    \n
  1. Medium absaugen und die Zellen einmal mit Ca\u00b2\u207a\/Mg\u00b2\u207a-freiem PBS waschen. Calcium und Magnesium stabilisieren die Zelladh\u00e4sion.<\/li>\n
  2. Vorgew\u00e4rmte Papainl\u00f6sung (37 \u00b0C) zugeben, gerade so viel, dass der Zellrasen bedeckt ist. Beispiel: 1 ml pro 25-cm\u00b2-Flasche.<\/li>\n
  3. Bei 37 \u00b0C inkubieren. Alle paar Minuten unter dem Mikroskop kontrollieren, bis sich die Zellen abrunden und abl\u00f6sen. Typisch sind 5\u201315 Minuten, je nach Zelltyp.<\/li>\n
  4. Die Reaktion durch Zugabe von mindestens dem gleichen Volumen serum- oder albuminhaltigen Mediums stoppen. Serum enth\u00e4lt \u03b12-Makroglobulin, das Papain hemmt.<\/li>\n
  5. Zellen sammeln, 5 Minuten bei 200\u2013300 \u00d7 g zentrifugieren und in frischem Medium resuspendieren.<\/li>\n<\/ol>\n

    Protokoll 2: Gewebe dissoziieren (z. B. Nervengewebe)<\/h2>\n
      \n
    1. Das Gewebe in kaltem Puffer pr\u00e4parieren und in kleine St\u00fccke (ca. 1 mm) schneiden.<\/li>\n
    2. Die St\u00fccke in auf 37 \u00b0C vorgew\u00e4rmte Papainl\u00f6sung \u00fcberf\u00fchren.\n