SimplaceCDX – chemisch definiertes Medium für HEK293T

Vollständig chemisch definiertes Medium ohne Bestandteile tierischen Ursprungs für die adhärente HEK293T-Kultur – für IND-vorbereitende und GMP-AAV-Produktion, wenn CDM-Dokumentation gefordert ist. Kein Serum, keine tierischen Proteine, keine rekombinanten Proteine.

Muster oder Angebot anfordern SimplaceX – hier beginnen

CDMVollständig chemisch definiert – jede Komponente bekannt und dokumentiert

AOFOhne tierischen Ursprung – kein TSE/BSE-Risiko, keine Fremdagenzien

IND-tauglichCDM-Dokumentation für den CMC-Teil von IND/CTA-Einreichungen

500 mL / 2 LForschungs- und Pilotmaßstab – GMP-Volumina auf Anfrage

Empfohlener Weg: HEK293T zuerst an SimplaceX adaptieren (5–10 Passagen), dann auf SimplaceCDX umstellen. Eine direkte Adaptation von FBS auf SimplaceCDX ist möglich, aber langsamer – typischerweise 10–15 Passagen statt 5–10 bei SimplaceX. Siehe den vollständigen Leitfaden zum Adaptationsprotokoll.

Was ist SimplaceCDX?

SimplaceCDX ist ein vollständig chemisch definiertes (CDM) Zellkulturmedium ohne Bestandteile tierischen Ursprungs für die adhärente HEK293T-Kultur. Anders als SimplaceX mit seinem definierten Proteinsupplement enthält SimplaceCDX keine tierischen oder rekombinanten Proteinbestandteile – jede Zutat ist ein synthetisches kleines Molekül oder eine definierte anorganische Verbindung. Dieses Medienformat ist nötig, wenn die GMP-Rohstoffdokumentation eine vollständige chemische Definition ohne tierische oder Proteinbestandteile nachweisen muss.

SimplaceCDX vs. SimplaceX – was verwenden?

Parameter	SimplaceX	SimplaceCDX
Zusammensetzung	Serumfrei, mit Proteinzusatz	Vollständig chemisch definiert – keine Proteine
frei von tierischen Bestandteilen	✅ Kein Serum	✅ Kein Serum, kein tierisches Protein
Proteinbestandteile	Definiertes Proteinsupplement enthalten	Keine – proteinfrei
GMP-Rohstoffrisiko	Gering – definiert, kein Serum	✅ Am niedrigsten – vollständig definierte synthetische/anorganische Komponenten
CDM-Dokumentation	Nicht vollständig CDM	✅ Vollständige CDM-Dokumentation verfügbar
Adaptationsaufwand	Einfacher – 5–10 Passagen	Anspruchsvoller – 10–15 Passagen von FBS oder 3–5 von SimplaceX
Nachgeschaltete Reinigung	✅ Keine Serumprotein-Verunreinigungen	✅ Überhaupt keine Proteinverunreinigungen
Wann verwenden	Forschung, Präklinik, frühe IND-Vorbereitung	IND-Vorbereitung mit CDM-Vorgabe, GMP-Herstellung

Warum chemisch definiertes Medium für GMP-AAV?

Alle kommerziell zugelassenen AAV-Gentherapien (Luxturna, Zolgensma, Hemgenix) werden mit chemisch definiertem oder serumfreiem Medium hergestellt. Regulatorische Leitlinien der FDA (Process Validation: General Principles and Practices) und der EMA (Leitlinie zu Qualitäts-, nichtklinischen und klinischen Anforderungen an ATMP-Prüfpräparate in klinischen Studien) fördern den Einsatz von CDM in der ATMP-Herstellung – aus drei konkreten Gründen:

Rohstoffrisiko: CDM-Rohstoffe sind synthetische oder definierte anorganische Verbindungen ohne biologische Variabilität und ohne Risiko durch Fremdagenzien – die Rohstoffkategorie mit dem höchsten Risiko (tierische Biologika) entfällt vollständig
Konsistenz von Charge zu Charge: CDM hat null Schwankungen in der Zusammensetzung zwischen Produktionschargen – das beseitigt eine wesentliche Quelle der Prozessvariabilität, die sonst mit umfangreichen historischen Daten belegt werden müsste
CMC-Dokumentation für IND/CTA: Mit CDM lässt sich eine vollständige Komponentenliste im Teil Chemistry, Manufacturing and Controls einreichen – ohne Einstufung als „proprietäre Mischung“ und ohne Dokumentation biologischer Quellen. Das vereinfacht die behördliche Prüfung.

Produktinformationen

Parameter	Spezifikation
Format	Vollständig chemisch definiert – keine tierischen oder rekombinanten Proteinbestandteile
Zelltyp	HEK293T (adhärent) – auch geeignet für HEK293, HEK293FT
Hauptanwendung	GMP-AAV-Produktion, IND-vorbereitende Vektorherstellung, lentivirale Vektoren
Verfügbare Volumina	500 ml, 2.000 ml – GMP-Volumina auf Anfrage
frei von tierischen Bestandteilen	✅ Vollständig CDM – keine tierischen oder rekombinanten Proteinbestandteile
Transfektionsverträglichkeit	Kompatibel mit PEI (linear 25 kDa) und PEI-Max
Sterilität	0,2 µm sterilfiltriert – Sterilitätsprüfung je Charge
Lagerung	2–8 °C, lichtgeschützt – 12 Monate ab Herstellung stabil
Dokumentation	Vollständige Komponentenliste, CoA, CDM-Erklärung – IMPD-unterstützende Dokumentation auf Anfrage
GMP-Signalweg	In Entwicklung – bitte kontaktieren Sie uns bezüglich Zeitplan und Anforderungen

Adaptationsprotokoll – von FBS zu SimplaceCDX

Empfohlener Weg: FBS → SimplaceX → SimplaceCDX

Phase 1 – Adaption an SimplaceX (5–10 Passagen)

Befolgen Sie das SimplaceX-Adaptationsprotokoll. Die vollständige Adaptation ist bestätigt, wenn die Verdopplungszeit über 3 aufeinanderfolgende Passagen stabil ≤ 22 h liegt.

Phase 2 – Übergang SimplaceX → SimplaceCDX (4 Passagen)

P1: 75 % SimplaceX + 25 % SimplaceCDX
P2: 50 % SimplaceX + 50 % SimplaceCDX
P3: 25 % SimplaceX + 75 % SimplaceCDX
P4+: 100 % SimplaceCDX

Wenden Sie in dieser Phase bei jeder Passage das Rettungsprotokoll für Suspensionszellen an.

Phase 3 – Adaptation bestätigen und AAV-Produktionstest durchführen

Stabile Verdopplungszeit ≤ 24 h in 100 % SimplaceCDX über 3 aufeinanderfolgende Passagen → kleinen AAV-Produktionstest durchführen (eine 15-cm-Schale), um den Titer vor dem Scale-up zu bestätigen.

Ablösen in SimplaceCDX: Verwenden Sie in SimplaceCDX PBS + 5 mM EDTA zum Ablösen der Zellen – Trypsin möglichst vermeiden; falls doch eingesetzt, vor dem Resuspendieren in SimplaceCDX vollständig durch Zentrifugation entfernen.

Häufig gestellte Fragen

Ist SimplaceCDX für die GMP-AAV-Herstellung geeignet?

SimplaceCDX ist für den GMP-Pfad formuliert – vollständig chemisch definiert, ohne tierischen Ursprung, mit CDM-Dokumentation für die CMC-Teile von IND/CTA. Produktionschargen in GMP-Qualität sind in Entwicklung – fragen Sie uns nach dem aktuellen Zeitplan und den Anforderungen für Ihr Programm.

Kann ich HEK293T direkt von FBS auf SimplaceCDX adaptieren?

Eine direkte Adaptation von FBS auf SimplaceCDX ist möglich, dauert aber meist 10–15 Passagen und führt zu stärker schwankenden Ergebnissen. Empfohlen ist der Weg FBS → SimplaceX (5–10 Passagen) → SimplaceCDX (4 Passagen) – insgesamt 9–14 Passagen für eine stabilere, schnellere Adaptation.

Welche Dokumentation gibt es für die CDM-Erklärung?

Vollständige Komponentenliste, Analysenzertifikat, Erklärung zur Freiheit von tierischem Ursprung und CDM-Erklärung sind verfügbar. Ein IMPD-unterstützendes Dokumentationspaket für IND/CTA-Einreichungen gibt es auf Anfrage – nennen Sie uns Ihre regulatorischen Anforderungen und Ihren Zeitplan.

Ist SimplaceCDX mit PEI-Transfektion für die AAV-Produktion kompatibel?

Ja – SimplaceCDX ist für die PEI-vermittelte Tripeltransfektion optimiert (lineares PEI 25 kDa, PEI-Max). Ohne Serumproteine kann sich kein Serum-PEI-Komplex bilden, der in teilweise serumhaltigen Medien die Transfektionseffizienz senken kann.

SimplaceCDX anfragen – Muster oder Angebot

In 500 ml und 2.000 ml erhältlich. Vollständige CDM-Dokumentation. Kostenloses Testmuster für die Adaptationsprüfung. GMP-Volumina auf Anfrage.

Muster oder Angebot anfordern info@seamlessbio.de