Was ist eine xeno-freie Zellkultur?

Xenofrei vs. serumfrei vs. tierkomponentenfrei

Diese drei Begriffe werden oft verwechselt. Serumfrei heißt nur: kein Vollserum – das Medium kann aber noch bovines Albumin oder Transferrin enthalten. Xenofrei heißt: keine Bestandteile fremder Spezies – humanes Albumin (rHSA) und humanes Thrombozytenlysat (hPL) sind für humane Zellen xenofrei. Tierkomponentenfrei (ACF) heißt: keine Bestandteile aus irgendeiner tierischen Quelle, auch nicht vom Menschen – zulässig sind nur rekombinante Proteine aus mikrobiellen oder pflanzlichen Expressionssystemen.

Wann ist xenofrei erforderlich?

Xenofreie Bedingungen sind erforderlich oder dringend empfohlen für: die ATMP-Herstellung (MSC, CAR-T, NK, iPSC-abgeleitete Zellen für den klinischen Einsatz), jedes Zelltherapieprodukt, bei dem eine Verunreinigung mit bovinen Proteinen ein Immunogenitätsrisiko für Patienten darstellt, und Zulassungsanträge, für die die EMA-Leitlinien zu Arzneimitteln für neuartige Therapien gelten. In der nicht-klinischen Forschung ist xenofrei optional, wird aber wegen der translationalen Relevanz zunehmend bevorzugt.

Praktische Bestandteile xenofreier Medien

FKS ersetzen durch: hPL (5 %) oder humanes AB-Serum (5–10 %) als Serumäquivalent + rHSA (1–2 g/l) als Albuminträger + rekombinantes humanes Transferrin (OsrhTF, 5–10 µg/ml) für den Eisentransport + rekombinantes humanes Insulin (10 µg/ml) + zelltypspezifische rekombinante Wachstumsfaktoren (rEGF, rFGF-2, rIGF-1).

Wichtige Fakten

• Xeno = fremde Spezies. Xenofrei = keine Bestandteile fremder Spezies im Kultursystem
• Für humane Zellkulturen sind FKS, BSA, bovines Transferrin und bovines Insulin alle xenogen (bovinen Ursprungs) – in xenofreien Protokollen ausgeschlossen
• Materialien humanen Ursprungs sind für humane Zellen xenofrei: hPL, humanes AB-Serum, rHSA, rekombinantes humanes Transferrin, rekombinantes humanes Insulin
• Xenofrei ist NICHT dasselbe wie serumfrei – hPL mit 5 % ist xenofrei, enthält aber serumähnliche Proteine
• Xenofrei ist NICHT dasselbe wie tierkomponentenfrei (ACF) – Materialien humanen Ursprungs sind xenofrei, aber nicht ACF
• Die EMA-Leitlinien zu neuartigen Therapien empfehlen xenofreie Bedingungen für die Herstellung humaner Zellen in klinischer Qualität (MSC, CAR-T, NK-Zellen)
• Hauptzweck: das Risiko xenogener Immunreaktionen bei Patienten ausschließen, die Zelltherapieprodukte mit bovinen Proteinen erhalten

Weiterlesen

• Xenofrei vs. serumfrei vs. ACF – vollständiger Vergleich
• Was ist rHSA?
• Was ist hPL?
• Protokoll zur serumfreien Adaptation

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