Sie untersuchen die Immunsuppression durch MSCs? Ihr Serum verfälscht Ihre Ergebnisse

Die Forschung zur MSC-Immunmodulation setzt voraus, dass parakrine Signale den Zellen zugeordnet werden können, nicht dem Medium. Eine serumbasierte Expansion bringt einen Hintergrund aus bovinen Zytokinen, Komplementfragmenten und Immunglobulinen ein, die zusammen mit dem MSC-konditionierten Medium aufgereinigt werden und nachgelagerte Immunsuppressionsassays stören.

CelliMax MSC1 expandiert MSCs in einer chemisch definierten, proteinreduzierten Formulierung. Das Ergebnis ist eine definierte Ausgangsbasis: Was Sie im konditionierten Medium nachweisen, stammt von Ihren MSCs und nicht aus verschlepptem Serum.

Anwendungen, bei denen sich eine definierte Expansion auszahlt

• Zytokinprofilierung: sauberer Hintergrund für Luminex- / ELISA-Panels – IDO, IL-6, IL-10, VEGF, HGF ohne Störung durch bovine Signale
• T-Zell-Suppressionsassays: MSC-konditioniertes Medium aus definierter Kultur liefert reproduzierbare Suppressionskurven – Serumchargen verschieben den EC50 unvorhersehbar
• PGE2- und COX-2-Quantifizierung: ein definiertes Medium vermeidet Arachidonsäure-Vorstufen aus dem Serum, die den PGE2-Hintergrund erhöhen
• Licensing-Assays (IFN-γ- + TNF-α-Co-Stimulation): gleichbleibende MSC-Ansprechbarkeit über alle Experimente – keine Chargenvariabilität im Ausgangs-Immunphänotyp

Für die Herstellung von konditioniertem Medium (MSC-CM)

Wenn Sie in Ihrem Workflow MSC-CM für die weitere Verwendung ernten – in Co-Kultur-, Organoid- oder In-vivo-Modellen –, ermöglicht CelliMax MSC1 eine serumfreie Konditionierung. Das gewonnene CM enthält keinen Hintergrund tierischen Ursprungs. Mengenpreise und GMP-Qualität sind für größere CM-Produktionen verfügbar.

Ein sauberer Licensing- und Auslese-Workflow

Die Immunsuppression durch MSC ist weitgehend induzierbar: Entzündliches „Licensing“ schaltet IDO, PGE2 und TSG-6 ein. Definierte Expansion gibt jedem Experiment denselben Ausgangspunkt.

• Licensing: IFN-γ allein oder IFN-γ plus TNF-α für 24–48 h ist der übliche Ansatz; Zytokinchargen und Konzentrationen über alle Experimente konstant halten.
• IDO-Aktivität: Kynurenin im Überstand messen, statt sich nur auf mRNA zu stützen – die Aktivität treibt die T-Zell-Suppression.
• PGE2 / COX-2: konditioniertes Medium unter serumfreien Bedingungen sammeln, damit serumbürtige Arachidonsäure die Basislinie nicht erhöht.
• T-Zell-Suppression: CFSE- oder Farbstoffverdünnungs-Proliferation stimulierter PBMC oder aufgereinigter T-Zellen bei mehreren MSC:Responder-Verhältnissen (zum Beispiel 1:2 bis 1:20) liefert eine verwertbare Dosis-Wirkungs-Kurve.
• Assay-Medium: das Kokulturmedium zwischen den Bedingungen identisch halten – Serum erst im Kokulturschritt zuzugeben, bringt die Variable zurück, die bei der Expansion entfernt wurde.

Warum Serum Sekretomdaten verzerrt

Serum bringt Zytokine, Wachstumsfaktoren, Komplementfragmente und Immunglobuline mit, die in ELISA- oder Luminex-Panels kreuzreagieren und mit dem konditionierten Medium mitgereinigt werden. Chargenwechsel verschieben dann EC50-Werte in Suppressions-Assays aus Gründen, die nichts mit den Zellen zu tun haben. Werden MSC in einem definierten Medium expandiert und konditioniert, stammt das gemessene Signal von den MSC.

Häufig gestellte Fragen

Verändert serumfreie Expansion die immunmodulatorische Kapazität von MSC?

In einem definierten Medium expandierte MSC behalten ihren charakteristischen Immunphänotyp (CD73, CD90, CD105) und reagieren auf IFN-γ/TNF-α-Licensing. Weil die Basislinie definiert ist, lassen sich Unterschiede zwischen Spendern oder Bedingungen leichter erkennen.

Kann ich das konditionierte Medium (MSC-CM) direkt in nachgelagerten Modellen einsetzen?

Ja. Konditioniertes Medium aus serumfreier Kultur hat keinen tierischen Hintergrund und eignet sich daher für Kokultur-, Organoid- und In-vivo-Modelle.

Welche Auslesungen profitieren am meisten von einem definierten Medium?

Zytokinpanels (IDO, IL-6, IL-10, VEGF, HGF), PGE2-Quantifizierung und T-Zell-Suppressions-Assays – alles Auslesungen, bei denen Serumproteine oder Chargeneffekte sonst Hintergrund erzeugen.

Gibt es eine GMP-Qualität für die klinische Entwicklung?

Ja. Das CelliMax® MSC-Medium wird unter ISO 13485 in GMP-Qualität hergestellt, mit vollständiger Dokumentation für regulatorische Einreichungen.

Produktseite: CelliMax® serumfreies MSC-Medium – Spezifikationen, Formate und Dokumentation.