Leitfaden Tierseren

Seren anderer Tierarten als Rinder erfüllen in der Forschung sehr spezifische Aufgaben – vom Blocken unspezifischer Bindungen in der Immunfluoreszenz bis zur Bereitstellung von Komplementaktivität für hämolytische Assays. Die falsche Spezies oder Qualität kostet Zeit und Geld. Dieser Leitfaden zeigt, wann und warum Sie welche Spezies verwenden.

Warum die Spezies zählt – das Grundprinzip

Die Wahl der Serumspezies folgt einer Regel: Das Blockierungsserum muss von derselben Spezies stammen, in der der Sekundärantikörper hergestellt wurde. Ist Ihr Sekundärantikörper Esel-anti-Kaninchen, muss Ihr Blockierungsserum normales Eselserum sein – nicht Ziegen- und nicht Pferdeserum. So bindet der Sekundärantikörper nicht unspezifisch an Serumproteine und erzeugt kein Hintergrundsignal.

Über das immunologische Blocken hinaus werden bestimmte Tierseren als Komplementquelle (Meerschweinchen), als Zellkulturzusatz (Pferd, Kaninchen) sowie als Negativkontrollen oder Matrixmaterial in der IVD-Entwicklung eingesetzt.

Leitfaden nach Spezies

Pferdeserum

Hauptanwendungen: Neurale Zellkultur (Neuronen, Astrozyten, Oligodendrozyten), Muskelzelldifferenzierung, Hybridomkultur, Myoblastendifferenzierung.

Pferdeserum enthält viele Wachstumsfaktoren, die die Differenzierung neuraler und muskulärer Zellen unterstützen – Anwendungen, für die FKS ungeeignet ist, weil seine mitogene Wirkung die terminale Differenzierung verhindert. Das Standardprotokoll für primäre Neuronenkulturen verwendet in den ersten 24–48 h DMEM/F12 + B27 + N2 + 5 % Pferdeserum zur Unterstützung der Anheftung und wechselt dann auf serumfrei. Für die Differenzierung von Myoblasten zu Myotuben löst der Wechsel von FKS auf 2–5 % Pferdeserum bei Konfluenz den Austritt aus dem Zellzyklus und die Fusion aus.

Normales Eselserum (NDS)

Hauptanwendung: Blockierungsreagenz in Immunfluoreszenz, IHC und ELISA bei Sekundärantikörpern aus dem Esel.

Nach der Ziege ist der Esel die meistgenutzte Spezies für die Herstellung von Sekundärantikörpern – vor allem, weil Esel-anti-Kaninchen-, Esel-anti-Maus- und Esel-anti-Ziege-Sekundärantikörper Kombinationen von Primärantikörpern verschiedener Spezies ohne Kreuzreaktivität erlauben. Normales Eselserum mit 5–10 % in PBS ist der Standard-Blockierungspuffer für Protokolle mit diesen Sekundärantikörpern. Wichtige Qualitätsparameter: IgG-Gehalt und Hämolyse – beide beeinflussen das Hintergrundsignal in der Immunfluoreszenz.

Meerschweinchen-Komplement

Hauptanwendung: Komplementquelle für hämolytische Assays, Komplementbindungsreaktionen und komplementabhängige Zytotoxizitätsassays (CDC).

Meerschweinchenserum hat eine außergewöhnlich hohe Komplementaktivität – die höchste aller gängigen Labortiere – und ist die Standard-Komplementquelle für hämolytische Assays und Komplementbindungsreaktionen in Serologie und Impfstoff-Immunogenitätsstudien. Meerschweinchen-Komplement ist labil: Es muss bei −80 °C gelagert, darf nie erneut eingefroren und muss innerhalb weniger Stunden nach dem Auftauen verwendet werden. Die Aktivität wird in 50%-hämolytischen Komplementeinheiten (CH50) angegeben – nennen Sie bei der Bestellung die gewünschte CH50-Aktivität.

Ziegenserum

Hauptanwendung: Blockierungsreagenz bei Sekundärantikörpern aus der Ziege, ELISA-Verdünnungspuffer.

Normales Ziegenserum (NGS) mit 5 % ist die Standard-Blockierungslösung für Protokolle mit Ziege-anti-Kaninchen-, Ziege-anti-Maus- oder Ziege-anti-Ratte-Sekundärantikörpern. Es wird auch häufig als universeller Protein-Blocker für ELISA-Platten eingesetzt, wenn der unspezifische Hintergrund mit BSA zu hoch ist. Qualitätskriterien: geringe Reaktivität endogener Immunglobuline mit gängigen Forschungsantigenen, geringe Hämolyse.

Kaninchenserum

Hauptanwendung: Normales Kaninchenserum (NRS) als Blockierungsreagenz, Negativkontrolle oder nicht-immune Kontrolle in Assays mit Kaninchenantikörpern.

Normales Kaninchenserum dient als isotypangepasste Negativkontrolle bei Primärantikörpern aus dem Kaninchen – unverzichtbar zur Validierung der Antikörperspezifität. Es wird auch als Blockierungsreagenz in Protokollen eingesetzt, in denen Sekundärantikörper aus dem Kaninchen ein artgleiches Blocken erfordern.

Ratten-Serum

Hauptanwendung: Syngene Zellkultur für Zelllinien aus der Ratte, Ex-vivo-Kultur von Immunzellen der Ratte, Entwicklung rattenspezifischer Immunoassays.

Schafserum / Lammserum

Hauptanwendungen: Komplementquelle (Schaf), Erythrozytensuspension für hämolytische Assays (Schaferythrozyten in standardisierter Suspension), Blocken bei Anti-Schaf-Sekundärantikörpern.

Mit Anti-sRBC-Hämolysin sensibilisierte Schaferythrozyten (sRBCs) sind das Standard-Indikatorsystem für hämolytische Assays mit Meerschweinchen-Komplement – die klassische Methode nach Mayer. Lammserum wird als Zellkulturzusatz für bestimmte primäre Zelltypen vom Schaf verwendet.

Schweineserum

Hauptanwendung: Kultur porciner Primärzellen, Xenotransplantationsforschung, Entwicklung von Veterinärimpfstoffen.

Affen- / Primatenserum

Hauptanwendungen: Präklinische Studien an nicht-menschlichen Primaten (NHP), Serologie primatenspezifischer Erreger, Primatenzellkultur.

NHP-Serum erfordert in der EU besondere Einfuhrunterlagen – es unterliegt dem Washingtoner Artenschutzübereinkommen (CITES). Nennen Sie uns Ihre gewünschte Spezies; wir bestätigen Verfügbarkeit und Einfuhrvoraussetzungen.

Hunde-Serum

Hauptanwendung: Entwicklung veterinärmedizinischer Diagnostik, Zellkultur vom Hund, vergleichende Onkologie.

Hamster-Serum

Hauptanwendung: Entwicklung hamsterspezifischer Immunoassays, Forschung mit CHO-Zellen (Ursprung: Ovar des Chinesischen Hamsters), Blocken bei Anti-Hamster-Sekundärantikörpern.

Hühnerserum

Hauptanwendung: Geflügelserologie, Forschung zur Newcastle-Krankheit und aviären Influenza, Blocken bei Anti-Huhn-Sekundärantikörpern (Anti-Huhn-IgY).

Esel-Serum

Siehe normales Eselserum oben – auch als Standard-Eselserum für Anwendungen über das Blocken in der Immunfluoreszenz hinaus erhältlich.

Schnellauswahl-Tabelle

Qualitätsspezifikationen, die Sie immer prüfen sollten

• Hämolyse: Hämoglobin <20 mg/dl – hämolytisches Serum stört optische Assays und verringert die Wachstumsfaktoraktivität
• Sterilität: 0,2 µm filtriert, auf Sterilität geprüft – unverzichtbar für Zellkulturanwendungen
• Mykoplasmen: per PCR oder Kultur negativ getestet – für jede Zellkulturanwendung erforderlich
• Endotoxin: für Komplementanwendungen – niedriges Endotoxin (<5 EU/ml), um eine unspezifische Komplementaktivierung zu vermeiden
• Speziesnachweis: Ursprungszeugnis – erforderlich für CITES-geschützte Arten und für die EU-Einfuhr bestimmter Primatenseren