Kurzdefinition
Was ist Low-Endotoxin-BSA?: Low-Endotoxin-BSA ist bovines Serumalbumin, das so verarbeitet und geprüft ist, dass es weniger als 1 EU/mg Endotoxin enthält. Standard-BSA kann durch Kontamination mit gramnegativen Bakterien bei der Verarbeitung 1–100 EU/mg enthalten – genug, um in empfindlichen Zelltypen bei üblichen Arbeitskonzentrationen die TLR4-Signalgebung zu aktivieren.
Wann verursacht Endotoxin im BSA Probleme?
BSA wird in Assaypuffern häufig mit 0,1–5 % (1–50 mg/ml) eingesetzt. Bei diesen Konzentrationen bringt selbst BSA mit „moderatem“ Endotoxin von 10 EU/mg 10–500 EU/ml in den Assay – weit über der TLR4-Aktivierungsschwelle von ~0,1 EU/ml. In jedem Assay, der Zytokinproduktion, NF-κB-Aktivierung oder Immunzellaktivierung misst, erzeugt dieses Hintergrund-Endotoxin falsch-positive Ergebnisse, unabhängig von der experimentellen Behandlung.
Wichtige Fakten
- Standard-BSA: 1–100 EU/mg Endotoxin, je nach Qualität und Lieferant
- Low-Endotoxin-BSA: <1 EU/mg – je Charge per chromogenem LAL-Assay geprüft
- 1 mg/ml Standard-BSA mit 10 EU/mg = 10 EU/ml im Medium – über der TLR4-Aktivierungsschwelle
- TLR4-Aktivierung ab >0,1 EU/ml löst NF-κB → IL-6, TNF-α, IL-1β in Monozyten, Makrophagen und Hepatozyten aus
- Erforderlich für: Kalibrierpuffer für Zytokin-ELISAs, zellbasierte Zytokinassays, Rezeptorbindungsstudien mit Immunzelllinien
- Gleiche Funktion wie Standard-BSA – die Endotoxinentfernung beeinträchtigt die Bindungseigenschaften des Albumins nicht
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