Kurzdefinition
Was ist fettsäurefreies BSA?: Fettsäurefreies BSA (BSA FAF) ist bovines Serumalbumin, aus dem gebundene Fettsäuren, Lipide und Steroidhormone durch Aktivkohlebehandlung oder Lösungsmittelextraktion entfernt wurden. Standard-BSA enthält 0,5–2 Mol Fettsäuren pro Mol Albumin – genug, um Fettsäurerezeptoren (PPAR, FFAR) zu aktivieren und IVF, Lipidstoffwechselforschung und DMPK-Proteinbindungsmessungen zu stören.
Warum Fettsäuren im BSA ein Problem sind
Albumin hat mehrere Fettsäure-Bindungsstellen (FA1–FA7). Sind sie mit endogenen Fettsäuren besetzt, entstehen zwei Probleme: (1) Fettsäurerezeptoren der Zellen (PPAR-α/γ/δ, FFAR1–4) werden unspezifisch aktiviert und erzeugen Hintergrund; (2) die Wirkstoffbindungsstellen des Albumins sind reduziert, was die scheinbare Wirkstoff-Albumin-Affinität in Proteinbindungsassays künstlich senkt.
FAF-BSA in DMPK-fu,mic-Assays
BSA FAF wird in Konzentrationen von 0,5–2 % zu mikrosomalen Stoffwechselstabilitätsassays gegeben, um die unspezifische Membranbindung lipophiler Substanzen zu verringern und die IVIVE-Genauigkeit zu verbessern. Verwendet wird gezielt BSA FAF – nicht Standard-BSA –, weil es keine konkurrierenden Fettsäuren an die Wirkstoffbindungsstellen bringt.
Wichtige Fakten
- Standard-BSA: ~0,5–2 Mol Fettsäure/Mol Albumin – überwiegend langkettige Fettsäuren (Palmitat, Oleat, Stearat)
- FAF-BSA: <0,005 % Fettsäuren – je Charge kolorimetrisch oder per GC-MS bestätigt
- In IVF-Medium mit 3–6 mg/ml eingesetzt – Fettsäuren aus Standard-BSA beeinträchtigen Spermienmotilität, Kapazitation und Eizellqualität
- Eingesetzt in PPAR-, LXR- und FXR-Kernrezeptorassays – Fettsäuren in Standard-BSA aktivieren diese Rezeptoren unspezifisch
- Eingesetzt zur DMPK-fu,mic-Korrektur – BSA FAF ist der Branchenstandard, um die Verteilung von Wirkstoffen in mikrosomale Lipide auszugleichen
- Eingesetzt als Zusatz in serumfreien Medien, wenn ein definierter Lipidgehalt erforderlich ist
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