Was ist FKS

Wofür wird FKS verwendet?

FKS wird Basalmedien (DMEM, RPMI 1640, MEM, F-12) zugesetzt, um ein vollständiges Wachstumsmedium herzustellen. Es liefert die komplexe Mischung aus Wachstumsfaktoren, Trägerproteinen und Nährstoffen, die die meisten Säugerzellen in vitro zum Überleben und zur Vermehrung brauchen. Ohne Serumzusatz bleiben die meisten Zelllinien höchstens 24–48 Stunden vital.

Wichtige Anwendungen sind: Erhaltung von Krebszelllinien, Primärzellkultur, Hybridomproduktion, Herstellung viraler Vektoren (AAV, Lentivirus, Adenovirus), Impfstoffproduktion, Stammzellforschung und Toxikologie-Assays.

Warum gibt es verschiedene FKS-Qualitäten?

Standard-FKS enthält 50–200 µg/ml bovines IgG, 1–10 EU/ml Endotoxin und Spuren von Tetrazyklin – alles Bestandteile, die bestimmte Assaytypen stören. Spezialqualitäten entfernen oder reduzieren diese Bestandteile für Anwendungen, in denen sie die Ergebnisse verfälschen würden:

• FKS Low Endotoxin (<1 EU/ml): für Zytokinassays, Wirkstoffscreening, AAV-Produktion
• FKS Low IgG (<200 µg/ml): für die Hybridom-mAb-Produktion mit Protein-A-Aufreinigung
• FKS Ultra Low IgG (<5 µg/ml): für die Produktion von Antikörpern in Diagnostikqualität
• FKS hitzeinaktiviert: für komplementempfindliche Assays und die Embryokultur
• FKS tetrazyklinfrei: für induzierbare Expressionssysteme (Tet-On/Tet-Off)

Alternativen zu FKS

Für Anwendungen, die xenofreie oder tierkomponentenfreie Bedingungen erfordern, lässt sich FKS durch humanes Thrombozytenlysat (hPL), humanes AB-Serum, rekombinantes humanes Albumin (rHSA) + definierte Wachstumsfaktoren oder chemisch definierte serumfreie Medien ersetzen. Die richtige Alternative hängt vom Zelltyp und den regulatorischen Anforderungen ab.

Wichtige Fakten

• FKS wird bei der Schlachtung trächtiger Kühe von Rinderföten gewonnen – der Fötus wird entnommen und das Blut unter sterilen Bedingungen per Herzpunktion abgenommen
• Standard-FKS enthält Wachstumsfaktoren (IGF-1, EGF, FGF-2), Albumin, Transferrin, Fibronektin, Hormone, Lipide und Spurenelemente
• FKS wird im Zellkulturmedium in Konzentrationen von 5–20 % eingesetzt – 10 % ist die häufigste Standardkonzentration
• Südamerikanische Herkunft (Brasilien, Argentinien, Uruguay) ist der weltweite Standard – von der OIE als Gebiet mit vernachlässigbarem BSE-Risiko eingestuft
• In vielen Qualitäten erhältlich: Standard, Low Endotoxin (<1 EU/ml), Low IgG (<200 µg/ml), Ultra Low IgG (<5 µg/ml), hitzeinaktiviert, gammabestrahlt, tetrazyklinfrei, ES-Zell-getestet
• Die Chargenvariabilität ist die wichtigste Einschränkung – für Studien von mehr als 3 Monaten Dauer wird eine Chargenreservierung empfohlen
• Das gesamte FKS von SeamlessBio wird in Deutschland verarbeitet und QC-geprüft, mit vollständigem CoA inklusive Sterilität, Mykoplasmen, Endotoxin, Viruspanel und Zellkultur-Leistungstest

Weiterlesen

• FKS-Qualitäten erklärt – welche ist die richtige?
• Protokoll zur FKS-Chargenprüfung
• FBS im Vergleich zu Humanserum
• Was ist hitzeinaktiviertes FKS?
• Leitfaden zur Umstellung auf serumfrei

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