Was ist humanes plättchen Lysat?

Wie wird hPL hergestellt?

Thrombozyten werden von gescreenten menschlichen Spendern per Apherese oder Vollblutspende gewonnen. Das Thrombozytenkonzentrat durchläuft 3–5 Gefrier-Tau-Zyklen (typischerweise −80 °C → 37 °C), die die Zellmembranen der Thrombozyten aufbrechen und den Zellinhalt freisetzen – dichte Granula (ADP, Serotonin, Calcium), α-Granula (PDGF, TGF-β, EGF, vWF, Fibronektin) und lysosomale Inhalte – ins umgebende Plasma. Anschließend wird das Lysat filtriert (0,2 µm) und aus mehreren Spendern gepoolt, um Chargenschwankungen zu verringern.

hPL vs. FKS – die wichtigsten Unterschiede

Anders als FKS liefert hPL Wachstumsfaktoren mit menschlicher Sequenz, die für humane Zellkulturen artgleich sind. Bei MSCs, Fibroblasten, Endothelzellen und anderen humanen Primärzellen binden menschliche Liganden effizienter an die Wachstumsfaktorrezeptoren als die bovinen Entsprechungen im FKS. Das erklärt, warum hPL mit 5 % bei humanen Zelltypen oft höhere Proliferationsraten erreicht als FKS mit 10 %.

Wann hPL statt FKS verwenden?

hPL eignet sich für: MSC-Expansion (Knochenmark, Fettgewebe, Nabelschnur), primäre humane Fibroblasten, Endothelzellen, Keratinozyten, die Herstellung von CAR-T- und NK-Zellen und jedes xenofreie ATMP-Protokoll. FKS bleibt die Wahl für: Nagerzelllinien, Hybridomkultur, Standard-Krebszelllinien und die Herstellung viraler Vektoren.

Wichtige Fakten

• hPL entsteht durch 3–5 Gefrier-Tau-Zyklen gepoolter humaner Thrombozytenkonzentrate von gescreenten Blutspendern
• Wachstumsfaktorgehalt 10- bis 50-mal höher als in Standard-FKS – besonders PDGF-AB, PDGF-BB, TGF-β1 und IGF-1
• hPL mit 5 % übertrifft FKS mit 10 % häufig bei Proliferationsrate und Populationsverdopplungszeit von MSCs
• Xenofrei: keine bovinen Bestandteile – geeignet für die ATMP-Herstellung und die Produktion humaner Zelltherapeutika in klinischer Qualität
• Enthält Fibrinogen – Heparin (2 IE/ml) zusetzen, um Gelbildung zu verhindern, oder fibrinogen-abgereicherte Formulierungen verwenden
• NICHT geeignet für die Hybridomkultur – humanes IgG (8–12 mg/ml) wird bei der Protein-A/G-Chromatographie mit dem murinen mAb co-aufgereinigt
• Formulierungen in GMP-Qualität mit vollständiger Spenderdokumentation der Blutbank erhältlich

Weiterlesen

• hPL – der vollständige Leitfaden: wann und wie Sie von FKS umsteigen
• Was ist Off-the-Clot-Serum?
• Protokoll zur serumfreien Adaptation
• Leitfaden iPSC- & Stammzellkultur

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