Eselserum | EU-Herkunft | sterilfiltriert

Warum ist Eselserum das bevorzugte Blocking-Reagenz für Multiplex-IHC-Panels?

In der Multiplex-IHC und Immunfluoreszenz werden mehrere Primärantikörper aus verschiedenen Wirtsspezies mit speziesspezifischen Sekundärantikörpern nachgewiesen. Verwendet das Panel Sekundärantikörper gegen mehrere Spezies – etwa Anti-Kaninchen- und Anti-Ziege-Sekundärantikörper –, darf das Blocking-Serum keine kreuzreaktiven Proteine einer dieser Spezies einbringen. Kaninchenserum würde den Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper stören, Ziegenserum den Anti-Ziege-Sekundärantikörper. Normales Eselserum (NDS) ist phylogenetisch neutral gegenüber Maus, Ratte, Kaninchen, Ziege, Schaf, Pferd und Mensch – ein einziger NDS-Blocking-Schritt deckt das gesamte Sekundärantikörper-Panel ohne Spezieskonflikte ab. Deshalb ist NDS in den meisten großen Forschungs- und Diagnostiklaboren das Standard-Blocking-Reagenz für Multiplex-IHC-Protokolle.

Wann eignet sich normales Eselserum NICHT als Blocking-Reagenz?

NDS sollte nicht verwendet werden, wenn das Panel Anti-Esel-Sekundärantikörper enthält oder der Primärantikörper selbst aus dem Esel stammt. In beiden Fällen würden NDS-Proteine mit dem Esel-Antikörper um die Bindung konkurrieren und den unspezifischen Hintergrund erhöhen. Für solche Panels muss ein anderes Blocking-Serum gewählt werden, passend zum phylogenetischen Abstand zu allen Spezies im Assay. Verwendet das Panel nur Primärantikörper aus Kaninchen und Maus mit Anti-Kaninchen- und Anti-Maus-Sekundärantikörpern, genügt Ziegenserum; NDS ist gezielt dann erforderlich, wenn zusätzlich Ziegen-Sekundärantikörper im Spiel sind oder maximaler phylogenetischer Abstand zu allen Panel-Spezies gefragt ist.

Lässt sich normales Eselserum als universeller Antikörperverdünner einsetzen?

Ja – verdünnen Sie NDS auf 1–2 % in PBS-T (phosphatgepufferte Salzlösung mit 0,05–0,1 % Tween-20) als universellen Verdünner für Primär- und Sekundärantikörper aller Spezies in Ihrem Panel. Ein speziesneutraler Verdünner verhindert zusätzlichen unspezifischen Hintergrund durch den Verdünner selbst und erhält eine gleichbleibende Antikörperaktivität während der Inkubation. Das ist besonders nützlich in Multiplex-IF-Protokollen, in denen alle Antikörperinkubationen unter identischen Hintergrundbedingungen laufen müssen. Dieselbe NDS-Blocking-Stammlösung lässt sich weiter verdünnen und als Verdünner verwenden – das vereinfacht die Reagenzienvorbereitung.

Gibt es normales Eselserum hitzeinaktiviert, und wann ist das nötig?

Ja – eine Hitzeinaktivierung (56 °C, 30 min) ist auf Anfrage möglich. Sie zerstört Komplementproteine und ist nötig, wenn eine Komplementaktivierung durch das Blocking-Serum den Assay stören würde – etwa in komplementempfindlichen zellbasierten Assays oder wenn das Serum als Matrixkontrolle in Komplementbindungsprotokollen dient. Für Standard-Blocking in IHC, IF, Western Blot und ELISA wird nicht hitzeinaktiviertes NDS verwendet. Bitte geben Sie die gewünschte Form bei Angebots- oder Musteranfrage an.

Welche Dokumentation erhalte ich zu normalem Eselserum aus der EU?

Jede Bestellung enthält Analysenzertifikat (CoA) und Herkunftszertifikat (CoO). Sicherheitsdatenblatt (SDS) und weitere Dokumente – Sterilitätsprüfberichte und Herkunftserklärungen – auf Anfrage. Die Produkte werden in nach ISO 9001 und ISO 13485 zertifizierten Partnerwerken gehandhabt. Chargenreservierung bis zu 36 Monate auf Anfrage – für gleichbleibende Chargen in der langfristigen Panel-Entwicklung, Diagnostikkit-Herstellung und Antikörpervalidierung.