August 2026 · 8 Min. Lesezeit

Humanes AB-Serum steht im Katalog jedes Life-Science-Lieferanten – wird aber selten richtig erklärt. Wann ist es FKS tatsächlich überlegen? Wann ist es unverzichtbar statt nur eine Alternative? Und wann sollten Sie bei FKS bleiben?

Dieser Leitfaden behandelt alles – von der Biologie, warum AB wichtig ist, über die Anwendungen, in denen Humanserum die richtige Wahl ist, bis zur praktischen Umstellung.

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Was ist humanes AB-Serum – und warum Typ AB?

Humanserum ist der zellfreie, gerinnselfreie Anteil des Vollbluts – die Flüssigkeit, die nach der Gerinnung und dem Entfernen von Gerinnsel und Zellen übrig bleibt. Es enthält Proteine (Albumin, Globuline, Komplement), Wachstumsfaktoren, Hormone, Lipide und Elektrolyte – im Wesentlichen dieselben Funktionsklassen wie FKS, aber von einem menschlichen Spender.

Typ AB bezieht sich auf die AB0-Blutgruppe. AB-Spender haben weder Anti-A- noch Anti-B-Antikörper im Serum – AB-Serum ist damit der universelle Typ, der mit Zellen von Spendern jeder AB0-Blutgruppe verwendet werden kann, ohne unspezifische Agglutination oder komplementvermittelte Lyse auszulösen. Deshalb ist praktisch alles Humanserum in der Zellkultur vom Typ AB: Es schaltet die Variable der AB0-Kompatibilität zwischen Spender und Empfänger aus.

So unterscheidet sich humanes AB-Serum von FKS

Parameter	FBS	Humanes AB-Serum
Herkunft	Blut von Rinderföten	Erwachsene menschliche Spender
IgG-Gehalt	50–200 µg/ml bovines IgG	~ 8–12 mg/ml humanes IgG
Wachstumsfaktorprofil	Bovin – hohes IGF-1, variables EGF/FGF	Human – speziesgleich für humane Zellen
Komplementaktivität	Aktiv (bovines Komplement)	Aktiv (humanes Komplement) – HI erhältlich
Xenogene Proteine	Ja – bovines Albumin, Globuline	Nein – nur humane Proteine
Chargenübergreifende Konsistenz	Mittel – Chargen von Einzeltieren schwanken	Mittel bis hoch – gepoolte Spenderchargen stabiler
Regulatorisch (ATMP/GMP)	Erfordert TSE/BSE-Dokumentation	Menschlichen Ursprungs, Formulierungen in GMP-Qualität erhältlich

Wann humanes AB-Serum die richtige Wahl ist

1. PBMC- und Immunzellassays

Das ist die wichtigste Anwendung für humanes AB-Serum. Mononukleäre Zellen des peripheren Bluts (PBMC) – T-Zellen, B-Zellen, NK-Zellen, Monozyten – reagieren äußerst empfindlich auf xenogene Proteine und Endotoxin. Standard-FKS verursacht in PBMC-Assays zwei konkrete Probleme:

Endotoxinbedingte Monozytenaktivierung: FKS enthält typischerweise 1–10 EU/ml Endotoxin, das Monozyten und Makrophagen über TLR4 aktiviert und eine unspezifische Sekretion von IFN-γ, TNF-α und IL-6 auslöst. Im ELISpot erhöht das die Hintergrund-Spotzahl so stark, dass antigenspezifische T-Zell-Antworten völlig überdeckt werden können.
Immunogenität boviner Proteine: In Assays zu antigenspezifischen T-Zell-Antworten können bovines Albumin und Globuline aus FKS vorsensibilisierte T-Zellen unspezifisch stimulieren – besonders bei Spendern mit früherem Kontakt zu Rinderproteinen.

Hitzeinaktiviertes humanes AB-Serum (56 °C für 30 Minuten) ist der Standard für ELISpot, Proliferationsassays, Zytokin-Multiplex und CAR-T-Wirksamkeitstests. Es beseitigt beide Probleme zugleich – keine xenogenen Proteine, Komplement inaktiviert gegen unspezifische Lyse.

2. Hybridomkultur und Produktion monoklonaler Antikörper

Moment – hieß es nicht, FKS sei für Hybridome nötig? Ja, aber humanes AB-Serum hat hier eine bestimmte Rolle. In der Klonierungs- und frühen Expansionsphase der Hybridomentwicklung wechseln manche Gruppen von FKS zu humanem AB-Serum, um bovines IgG früher aus dem Workflow zu entfernen.

Der Haken: Humanes AB-Serum enthält 8–12 mg/ml humanes IgG – deutlich mehr als FKS. Für die Protein-A/G-Aufreinigung muriner mAk ist das ebenso problematisch. Humanes AB-Serum eignet sich daher nur für Hybridomanwendungen, deren Aufreinigung ohne Protein-A/G-Chromatographie auskommt oder bei denen der murine mAk mit einer IgG-subklassenspezifischen Methode aufgereinigt wird, die humane von murinen Antikörpern unterscheidet.

3. IVD-Assay-Entwicklung und Kalibratormatrizes

IVD-Hersteller (In-vitro-Diagnostika), die Immunoassays für klinische Marker entwickeln (Troponin, CRP, Schilddrüsenhormone, Vitamin D usw.), brauchen eine humane Matrix, die der Patientenprobe möglichst nahekommt. Humanes AB-Serum ist die Standard-Referenzmatrix für:

Herstellung von Kalibratoren und Kontrollmaterial
Matrixinterferenzstudien (CLSI-Protokoll EP7)
Charakterisierung des Hook-Effekts
Kreuzreaktivitätstests
Studien zur Chargenkonstanz für IVD-Zulassungsanträge (EU-IVDR 2017/746)

Für IVD-Anwendungen bildet gepooltes humanes AB-Serum mehrerer Spender die interindividuelle Variation repräsentativer ab als Einzelspendermaterial. SeamlessBio liefert gepooltes humanes AB-Serum von Spendern aus der EU und den USA mit vollständiger Dokumentation des Spenderscreenings für IVD-Zulassungsanträge.

4. Plasmastabilitätsassays in der DMPK

Bei hydrolyseempfindlichen Wirkstoffkandidaten (Ester, Amide, Prodrugs, Peptide) wird die Plasmastabilität gemessen, indem die Substanz direkt in Humanserum bei 37 °C inkubiert wird. Humanes AB-Serum ist die geeignete Matrix – es enthält Esterasen (Butyrylcholinesterase, Paraoxonase, Carboxylesterasen) in physiologisch repräsentativen Konzentrationen. Gepooltes humanes AB-Serum ist Einzelspendermaterial vorzuziehen, um interindividuelle Unterschiede der Enzymaktivität zu verringern.

5. Krebszelllinien und humane Primärzellen

Bei etablierten humanen Krebszelllinien (HeLa, A549, MCF-7, HCT116) ist humanes AB-Serum mit 10 % oft ein direkter Ersatz für FKS – gleiche Konzentration, gleiches Protokoll, keine Adaptation nötig. Das Wachstumsfaktorprofil ist speziesgleich für humane Zellen und beseitigt die kleine, aber messbare Abweichung, die bovines FKS bei humanen Zelllinien mit sich bringt.

Bei humanen Primärzellen – besonders Endothelzellen, Keratinozyten und Fibroblasten – ist humanes AB-Serum FKS oft überlegen und liefert dank speziesgleicher Wachstumsfaktorsignale höhere Proliferationsraten und einen besseren Erhalt des Zellphänotyps.

Off-the-Clot-Serum (OTC) vs. Standard-Humanserum – was ist der Unterschied?

Zwei Gewinnungsmethoden liefern Humanserum mit unterschiedlichen Wachstumsfaktorprofilen:

Standardserum (plasmagewonnen): Das Blut wird mit Antikoagulans entnommen; die Gerinnung wird anschließend durch Zugabe von Calciumchlorid ausgelöst. Der Gerinnungsprozess ist kontrolliert und schnell. Die Thrombozytendegranulation ist gering – daher weniger PDGF, TGF-β und EGF als bei OTC-Serum. Gleichmäßiger zwischen Chargen. Bevorzugt für IVD, diagnostische Matrizes und Anwendungen mit definiertem Wachstumsfaktor-Basiswert.
Off-the-Clot-Serum (OTC): Das Blut gerinnt ohne Antikoagulans auf natürliche Weise bei Raumtemperatur. Die natürliche Gerinnung führt zu vollständiger Thrombozytenaktivierung und -degranulation und setzt intrazelluläre Wachstumsfaktoren frei (PDGF, EGF, TGF-β, FGF). OTC-Serum enthält mehr Wachstumsfaktoren als Standardserum – in seiner mitogenen Wirkung näher an hPL. Bevorzugt für Zellkulturanwendungen mit maximalem Wachstumsbedarf.

Für PBMC-Assays und Immunologie: hitzeinaktiviertes Standard-AB-Serum. Für Zellproliferation und Primärzellkultur: OTC-Humanserum. Für IVD-Kalibratoren und diagnostische Matrizes: Standard-AB-Serum.

Hitzeinaktivierung – wann ist sie nötig?

Humanserum enthält aktive Komplementproteine, die Zellen lysieren können – besonders relevant für PBMC-Assays, da Lymphozyten und Monozyten empfindlich auf komplementvermittelte Lyse reagieren. Die Hitzeinaktivierung bei 56 °C für 30 Minuten zerstört die Komplementaktivität (C3, C4, C5 werden denaturiert), ohne Wachstumsfaktorgehalt oder Albuminfunktion wesentlich zu beeinträchtigen.

Hitzeinaktiviertes Humanserum verwenden für: PBMC-Assays, ELISpot, T-Zell-Proliferation, NK-Zell-Zytotoxizitätsassays und jeden Assay, in dem komplementvermittelte Lyse der Zielzellen das Ergebnis verfälschen würde.

Nicht hitzeinaktiviertes Humanserum verwenden für: IVD-Kalibratoren und -Kontrollen (der Komplementgehalt gehört zur nachgebildeten physiologischen Matrix), Proteinbindungsassays, Plasmastabilitätsassays.

Direkter Wechsel von FKS zu humanem AB-Serum – Protokoll

Bei etablierten humanen Krebszelllinien gelingt der Wechsel meist direkt:

FKS-Medium durch dasselbe Basalmedium + 10 % humanes AB-Serum ersetzen
2–3 Passagen beobachten: Viabilität, Verdopplungszeit, Morphologie
Bleiben die Parameter stabil → keine weitere Adaptation nötig

Bei empfindlichen Zelllinien oder Primärzellen ein zweistufiger Übergang über 4 Passagen: 2 Passagen 50 % FKS / 50 % humanes AB-Serum, dann 100 % humanes AB-Serum.

Hinweis: Humanes AB-Serum enthält deutlich mehr IgG als FKS. Nutzt Ihr Assay Anti-Human-IgG-Sekundärantikörper zum Nachweis, prüfen Sie, ob der hohe humane IgG-Hintergrund stört – passen Sie die Konzentration des Sekundärantikörpers an oder verwenden Sie einen Nachweis auf Basis von Fab-Fragmenten.

Erhältlich bei SeamlessBio

Humanes AB-Serum – gemischte Spender: Herkunft EU und USA, gepoolt, Standard und hitzeinaktiviert. 100 ml und 500 ml.
Humanes AB-Serum männlich: Spenderpool nur aus Männern für die Entwicklung von Testosteron-, PSA- und Sexualhormonassays.
Humanes OTC-Serum: Off-the-Clot für maximalen Wachstumsfaktorgehalt.
Individuelle Spezifikationen auf Anfrage: gammabestrahlt, delipidiert, IgG-abgereichert, bestimmte Spenderaltersgruppen, Seren mit Krankheitsstatus.

Chargenreservierung möglich – unverzichtbar für IVD-Assay-Programme über 6–18 Monate. Kontaktieren Sie uns unter info@seamlessbio.de für Testmengen und Angebote innerhalb von 48 Stunden.

Zusammenfassung – fünf Situationen, in denen humanes AB-Serum die richtige Wahl ist

PBMC- und Immunzellassays: ELISpot, Zytokin-Multiplex, T-Zell-Proliferation – immer hitzeinaktiviertes humanes AB-Serum
IVD-Kalibrator und diagnostische Matrix: humane Matrix für die Nachbildung von Patientenproben erforderlich
Plasmastabilität in der DMPK: humanes AB-Serum liefert speziesrelevante Esteraseaktivität
Humane Primärzellkultur: speziesgleiche Wachstumsfaktoren, keine xenogenen Proteine
Jeder Assay, in dem bovines IgG oder Proteine stören würden: Durchflusszytometrie mit Anti-Rinder-Antikörpern, Assays mit humanen Fc-Rezeptor-tragenden Zellen

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Humanes AB-Serum – vollständiger Leitfaden zu Anwendungen, Qualitäten & wann sich der Wechsel lohnt