Beschreibung
Produktübersicht
Die Humanes P-gp + FluoPgp-Vesikel-Kit (HEK293) kombiniert das bewährte Inside-out-Vesikelsystem für P-Glykoprotein von Cell4Pharma mit dem proprietären fluoreszierenden Sondensubstrat FluoPgp – radioaktiv markierte Verbindungen oder eine LC-MS/MS-Infrastruktur sind nicht nötig. Das Ergebnis ist ein schneller, plattenreaderkompatibler P-gp-Transportassay für Hochdurchsatz-Screening (HTS), Profiling von Substanzbibliotheken und Labore ohne Radiolabel- oder Massenspektrometrie-Ausstattung.
P-Glykoprotein (ABCB1 / MDR1) ist laut FDA-DDI-Leitlinie (2020) und EMA-DDI-Leitlinie (2013/2022) ein Tier-1-DDI-Transporter – die Bewertung als Substrat und Inhibitor ist für alle neuen Wirkstoffkandidaten regulatorisch vorgeschrieben. Dieses Kit liefert IC₅₀-Daten mit voller regulatorischer Gültigkeit per Fluoreszenzdetektion, ohne das zugrunde liegende Prinzip des vesikulären Transportassays zu ändern. Verwenden Sie es zusammen mit den Kit für Human-Kontrollvesikel zur passenden Hintergrundkorrektur. Wird Radiolabel- oder LC-MS/MS-Detektion bevorzugt, ist das Kit für menschliche P-gp-Vesikel separat erhältlich.
Technische Daten
| Parameter | Spezifikation |
|---|---|
| Transporter | Humanes P-gp / MDR1 (ABCB1) |
| Expressionssystem | HEK293 (transiente Überexpression) |
| Vesikeltyp | Inside-out-Membranvesikel |
| Sondensubstrat | FluoPgp – proprietäres fluoreszierendes P-gp-Substrat von Cell4Pharma |
| Reaktionen pro Kit | 100 |
| ATP/AMP-Transportverhältnis | > 5 (je Charge garantiert) |
| Detektionsmethode | Fluoreszenz-Plattenreader – kein Radiolabel, kein LC-MS/MS nötig |
| Lagerung | −80 °C (Versand auf Trockeneis) |
| Kit-Inhalt | Vesikel, FluoPgp-Substrat, ATP, AMP, Reaktionspuffer, Waschpuffer, CoA |
| Hersteller | Cell4Pharma (Niederlande) |
| Vertrieb DACH | SeamlessBio GmbH, Passau |
| Regulatorisch | Nur für Forschungszwecke (RUO) |
Anwendungen
| Anwendung | Beschreibung |
|---|---|
| P-gp-Screening mit hohem Durchsatz (HTS) | Screenen Sie große Substanzbibliotheken per Fluoreszenzauslesung auf ihr P-gp-Hemmpotenzial. FluoPgp ist mit allen gängigen Fluoreszenz-Plattenreadern und automatisierten Liquid-Handling-Systemen kompatibel – ohne Szintillationszähler, Massenspektrometer oder Radiolabel. |
| Regulatorische P-gp-DDI-Bewertung ohne Radiolabel | Bestimmen Sie IC₅₀-Werte für FDA/EMA-DDI-Anträge per Fluoreszenzdetektion. Die regulatorische Gültigkeit hängt von den Assaybedingungen und dem ATP/AMP-Verhältnis ab, nicht von der Detektionsmethode – Fluoreszenzdaten aus einem validierten vesikulären Transportassay mit geeigneten Kontrollen werden anerkannt. |
| Labore ohne Radiolabel-Infrastruktur | Vollständiger P-gp-Transportassay mit vollständigem regulatorischem Datenoutput für jedes Labor mit Fluoreszenz-Plattenreader. Kein radioaktiver Abfall, keine besonderen Umgangsgenehmigungen oder lizenzierten Einrichtungen nötig. |
| Profiling von Substanzbibliotheken und frühes Screening | Kosteneffizientes Profiling von P-gp-Substraten und -Inhibitoren in der Leitstrukturoptimierung, bevor Radiolabel- oder LC-MS/MS-Bestätigungsassays eingesetzt werden. Das Assayformat erlaubt das parallele Screening großer Substanzsammlungen. |
Assay-Prinzip
Inside-out-Membranvesikel präsentieren die zytoplasmatische Seite von P-gp zum äußeren Assaypuffer und ermöglichen die ATP-abhängige Aufnahme des FluoPgp-Substrats ins Vesikellumen. Die Vesikel werden mit Testsubstanz und FluoPgp in Gegenwart von ATP (aktiver Transport) oder AMP (Hintergrundkontrolle) inkubiert. Die Reaktion wird mit kaltem Waschpuffer gestoppt, die Vesikel werden per Schnellfiltration abgetrennt und die intravesikuläre FluoPgp-Fluoreszenz direkt im Plattenreader quantifiziert. Das ATP/AMP-Fluoreszenzverhältnis – berechnet gegen passende humane Kontrollvesikel – bildet das Assayfenster für die IC₅₀-Bestimmung. Das Assayprinzip ist identisch mit dem Standardformat des vesikulären Transports mit Radiolabel; nur der Detektionsschritt unterscheidet sich.
Gesamtes Kit-Portfolio von Cell4Pharma
Alle ABC-Transporter-Vesikel-Kits aus einer EU-Quelle bestellen – schnelle Lieferung in der Kühlkette, garantierte ATP/AMP-Verhältnisse, vollständige Chargendokumentation.
| Bausatz | Transporter | Gen | ATP/AMP-Verhältnis |
|---|---|---|---|
| Kit für menschliche BCRP-Vesikel | BCRP | ABCG2 | >10 |
| BSEP-Vesikel-Kit für den Menschen | BSEP | ABCB11 | >10 |
| MRP1-Vesikel-Kit für den Menschen | MRP1 | ABCC1 | >5 |
| MRP2-Vesikel-Kit für den Menschen | MRP2 | ABCC2 | >20 |
| MRP3-Vesikel-Kit für den Menschen | MRP3 | ABCC3 | >5 |
| MRP4-Vesikel-Kit für den Menschen | MRP4 | ABCC4 | >5 |
| MRP5-Vesikel-Kit für den Menschen | MRP5 | ABCC5 | >5 |
| MRP8-Vesikel-Kit (menschlich) | MRP8 | ABCC11 | >5 |
| Kit für menschliche P-gp-Vesikel | P-gp / MDR1 | ABCB1 | >5 |
| Humanes P-gp + FluoPgp-Kit | P-gp / MDR1 | ABCB1 | >5 |
| Kit für Human-Kontrollvesikel | — | HEK293 Leervektor | — |
Verfügbare Formate
| Format | Reaktionen |
|---|---|
| Bausatz | 100 Reaktionen |
Die wichtigsten Vorteile
Sammelreservierung
Validierte Chargen bis zu 36 Monate reservieren – für reproduzierbare Langzeit-DDI-Screenings.
Vollständige Dokumentation
Chargenspezifischer QC-Bericht und Datenblatt bei jedem Kit – aus nach ISO 9001 und ISO 13485 zertifizierten Partnerwerken.
Lieferung EU & Schweiz
Hergestellt von Cell4Pharma (Niederlande) – schnelle Lieferung in der Kühlkette in die EU, nach Großbritannien und in die Schweiz.
Häufig gestellte Fragen
Wird der FluoPgp-Fluoreszenzassay von FDA und EMA für DDI-Anträge anerkannt?
Ja – die regulatorische Anerkennung eines vesikulären Transportassays hängt vom nachgewiesenen ATP/AMP-Transportverhältnis (> 5), geeigneten Positiv- und Negativkontrollen und validierten Assaybedingungen ab, nicht von der Detektionsmethode. Fluoreszenzdaten aus einem validierten vesikulären Transportassay mit FluoPgp und den im Kit enthaltenen Kontrollmaterialien erfüllen den Nachweisstandard für DDI-Anträge nach FDA-DDI-Leitlinie (2020) und EMA-DDI-Leitlinie (2013/2022). Der chargenspezifische QC-Bericht und das Datenblatt jedes Kits dokumentieren das für regulatorische Unterlagen nötige ATP/AMP-Verhältnis und die Assayleistung.
Was ist das FluoPgp-Substrat, und wie unterscheidet es sich von radioaktiv markierten Standard-P-gp-Substraten?
FluoPgp ist ein proprietäres fluoreszierendes Sondensubstrat von Cell4Pharma, das von P-Glykoprotein (ABCB1) ATP-abhängig transportiert wird. Im vesikulären Transportassay funktioniert es genauso wie klassische radioaktiv markierte P-gp-Substrate wie [³H]-Vinblastin oder [³H]-Digoxin – die ATP-abhängige Anreicherung in den Vesikeln wird quantifiziert und zwischen ATP- und AMP-Bedingung verglichen. Der Unterschied liegt nur in der Detektion: Die FluoPgp-Fluoreszenz wird direkt in einem Standard-Plattenreader gemessen. Szintillationszähler, LC-MS/MS-System, Umgang mit radioaktiv markierten Substanzen und Entsorgung radioaktiver Abfälle entfallen. Durchsatz und Datenqualität entsprechen Radiolabel-basierten Formaten.
Lässt sich das FluoPgp-Substrat mit vorhandenen P-gp-Vesikeln aus anderer Quelle verwenden?
Das FluoPgp-Substrat ist fester Bestandteil dieses Kombi-Kits und speziell gegen die P-gp-Vesikelpräparation von Cell4Pharma validiert. Die Kompatibilität mit Vesikeln anderer Quellen wurde nicht getestet und kann nicht garantiert werden. Wenn Sie bereits P-gp-Vesikel von Cell4Pharma haben und einen bestehenden Workflow um die FluoPgp-Fluoreszenz erweitern möchten, sprechen Sie uns auf die Optionen an. Für neue Projekte bietet das Kombi-Kit P-gp + FluoPgp den einfachsten und am vollständigsten validierten Weg zu fluoreszenzbasierten P-gp-DDI-Daten.
Wann sollte das Standard-Kit Humanes P-gp-Vesikel-Kit statt des FluoPgp-Kits verwendet werden?
Das Standard-Kit Humanes P-gp-Vesikel-Kit (ohne FluoPgp) ist vorzuziehen, wenn Radiolabel- oder LC-MS/MS-Detektion im Labor bereits etabliert und für Ihr Zulassungspaket bevorzugt ist, wenn die Testsubstanz selbst fluoresziert und das FluoPgp-Signal stören würde oder wenn eine bestehende validierte SOP eine Nicht-Fluoreszenz-Detektion vorschreibt. In allen anderen Fällen – etwa Hochdurchsatz-Screening, frühes Profiling und Labore ohne Radiolabel-Infrastruktur – bietet das FluoPgp-Kit einen einfacheren und schnelleren Weg zu denselben P-gp-Transportdaten in regulatorischer Qualität.
Welche Dokumentation erhalte ich zum Humanen P-gp + FluoPgp-Vesikel-Kit?
Jeder Kit-Lieferung liegen ein chargenspezifischer QC-Bericht, der das ATP/AMP-Transportverhältnis (> 5) mit dem FluoPgp-Substrat bestätigt, und ein Datenblatt mit empfohlenen Assaybedingungen, FluoPgp-Konzentrationen und Referenzinhibitoren (z. B. Elacridar / GF120918, Verapamil) bei. Alle Kits von Cell4Pharma werden unter nach ISO 9001 und ISO 13485 zertifizierten Qualitätssystemen hergestellt. Chargenreservierung bis zu 36 Monate auf Anfrage – für gleichbleibendes FluoPgp-Substrat und gleichbleibende Vesikelpräparation über lange Screening-Kampagnen.
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